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大动物胚胎干细胞的建系虽然研究多年,但是迄今也没有真正的建系成功。因此,利用新的方法获得大动物干细胞有待进一步探索。诱导多能干细胞(iPSCs)的诞生将干细胞的研究带入了一个新的时代,也可能为大动物干细胞的建系培养提供了一条新的途径。本研究采用异位表达水牛外源特异性转录因子结合实验室现有水牛干细胞培养体系,将水牛成纤维细胞诱导重编程为多能干细胞。结果表明,通过逆转录病毒将水牛特异性转录因子(Oct4,Sox2,c-Myc,Klf4)导入水牛成纤维细胞,能将水牛的成纤维细胞重编程为多能干细胞(biPSCs),biPSCs核型正常,碱性磷酸酶染色呈阳性；通过RT-PCR鉴定,获得的biPSCs能表达Nanog、 Lin28、FOXD3、STAT3、GP130、E-cadherin等干细胞标志基因；免疫组化鉴定,Oct4、Nanog、SSEA-1、TRA-1-81呈阳性；其中biPS1和biPS5外源转基因沉默,能形成拟胚体,表达三个胚层标志基因AFP (endoderm),GATA4、ACTA2(mesoderm),TUBB3(ectoderm)。水牛iPSCs的成功重编程将解决水牛ES来源和低效率克隆形成率的限制,为水牛干细胞信号通路及建系的研究提供干细胞来源,同时也为水牛定向遗传改良提供了一条新的途径。