类鸭甲肝病毒的分子流行病学研究

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引言类鸭甲肝病毒(AilivirusA,AalV-A)是本室2012年从广西的商品肉鸭中发现的一种新微RNA病毒。本研究旨在对不同地区的样品进行分子检测,以了解AalV-A在我国鸭群中的感染情况。材料方法从山东、河北、河南、辽宁、江苏和广西采集北京鸭组织样品175份,从北京、山东和广西采集北京鸭粪便样品219份,从黑龙江某孵化场收集出壳前死亡鹅胚36枚,从山东某场采集樱桃谷北京鸭种蛋8枚,从湖南采集霍尔多巴吉鹅组织样品39份、粪便样品25份及出壳前死亡胚32枚,从广东采集麻鸭粪便样品72份和出壳前死亡胚20枚,从内蒙古、山东、安徽、河南、辽宁和广西采集出壳前的死亡北京鸭胚111枚。按常规方法处理组织样品、粪便样品、胚组织混合物(肝、肾和肠)以及种蛋的蛋黄,用AalV-A的RT-PCR进行检测,对核酸阳性样品的PCR产物进行回收、克隆和测序,用生物信息软件进行序列分析。结果从辽宁、河北、江苏和广西的6份北京鸭组织样品检出AalV-A,从北京、山东和广西的85份北京鸭粪便中检出AalV-A,从黑龙江的4份死亡鹅胚中检出AalV-A,从山东的3份樱桃谷北京鸭种蛋中检出AalV-A,湖南和广东的样品为AalV-A阴性。总阳性率为13.30%(98/737)。所测序列之间的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为85%~100%和86%~100%。讨论从粪便样品中检出AalV-A,表明AalV-A可经粪便排毒。易从肝脏中检出AalV-A,提示肝脏可能是AalV-A的主要靶器官。从樱桃谷鸭种蛋和鹅胚中检出AalV-A,提示AalV-A存在垂直传播的可能。从北京鸭、樱桃谷鸭和鹅中检测到AalV-A,表明AalV-A感染的宿主范围较广。北京、山东、河北、辽宁、黑龙江、江苏和广西均存在AalV-A感染,表明AalVA感染的分布非常广泛。序列分析结果显示,AalV-A存在一定的变异性,符合2A区高变异性的特征。结论AalV-A感染的宿主范围和地区分布均很广泛,该病毒可经水平途径传播,亦可能会经卵垂直传播。
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