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目的:观察H2S对LPS刺激下PASMC中HO-1表达和内源性CO生成的影响,以进一步探讨H2S减轻LPS所致细胞损伤的分子机制.
方法:实验细胞随机分为4组:①对照组:常规DMEM培养基培养;②LPS组:培养基中加入LPS(30mg·L-1);③NaHS+LPS组:DMEM培养基中加入NaHS(0.5mM),10min后再加入LPS (30mg·L-1);④PPG+LPS组:培养基中加入PPG(10mM),10min后再加入LPS (30mg·L-1).加药后继续培养8h后检测培养上清中CO含量和细胞中HO活性,应用免疫细胞化学染色和Western blot方法检测细胞中HO-1蛋白表达,采用RT-PCR方法检测细胞中HO-1mRNA表达.
结果:LPS可诱导PASMC中HO-1mRNA和蛋白表达,与对照组相比,其HO活性增强、CO产生增多(P均<0.01);与LPS组相比,NaHS与LPS共同孵育使PASMC中HO-1mRNA和蛋白表达、HO活性、培养上清中CO含量进一步升高(P均<0.01);PPG可一定程度上抑制LPS对HO-1/CO的诱导作用(P<0.05或P<0.01)。
结论:内、外源性H2S可上调HO-1/CO通路,这可能是H2S发挥细胞保护作用的机制之一。