【摘 要】
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目的:探讨特异性小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对晚期糖基化终产物受体(receptor for advancedglycation end products, AGER or RAGE)介导肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSCs)激活和胶原生成的影响。方法:构建RAGE特异性siRNA表达载体,经脂质体将其转染HSC-T6细
【机 构】
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东南大学附属中大医院消化科(江苏南京 210009)
【出 处】
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首届国际中西医结合大肠肛门病学术论坛暨第十二届全国中西医结合大肠肛门病学术会议
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目的:探讨特异性小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对晚期糖基化终产物受体(receptor for advancedglycation end products, AGER or RAGE)介导肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSCs)激活和胶原生成的影响。方法:构建RAGE特异性siRNA表达载体,经脂质体将其转染HSC-T6细胞,以空白和转染非特异性siRNA表达载体pGCsi-C为对照,分别用实时荧光定量PCR和Western印迹法检测各组HSC-T6细胞RAGE、α-SMA和Ⅰ型胶原基因及蛋白的表达。结果:与空白对照组相比,转染特异性siRNA表达载体pGCsi-R1的HSC-T6细胞的RAGE mRNA和50KD、46KD RAGE蛋白的表达分别下调(79.65±8.88)%(F=26.005,P<0.01)、(56.09±1.18)%(F=365.185,P<0.01)和(63.67±0.78)%(F=386.07,P<0.01),同时α-SMAmRNA和蛋白、Ⅰ型胶原mRNA和蛋白的表达也受到明显抑制,分别为空白对照组的57.53%±3.25%(F=20.913,P<0.05)、58.48%±3.08%(P=56.592,P<0.05)、71.16%±8.04%(F=18.091,P<0.05)和71.91%±1.12%(F=17.299,P<0.05)。 结论:RAGE特异性siRNA可在细胞内稳定表达,并能有效地抑制HSCs的激活和Ⅰ型胶原的生成。
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