【摘 要】
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采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens,LBA4404菌株)介导法,以‘粗枝大叶黄杨(Euonymus japonicus‘Cu Zhi,别名北海道黄杨)的△1-吡咯啉-5-羧酸合成酶基因(P5CS)转化扶芳藤(Euonymus fortunei)的下胚轴.研究了农杆菌菌液浓度、侵染时间、共培养时间、乙酰丁香酮(AS)和PPT浓度(phosphinothricin)等因
【机 构】
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中国农业大学观赏园艺与园林系,北京 100193 中国农业大学观赏园艺与园林系,北京 100193
【出 处】
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中国园艺学会观赏园艺专业委员会2009年全国观赏园艺年会
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采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens,LBA4404菌株)介导法,以‘粗枝大叶黄杨(Euonymus japonicus‘Cu Zhi,别名北海道黄杨)的△1-吡咯啉-5-羧酸合成酶基因(P5CS)转化扶芳藤(Euonymus fortunei)的下胚轴.研究了农杆菌菌液浓度、侵染时间、共培养时间、乙酰丁香酮(AS)和PPT浓度(phosphinothricin)等因素对遗传转化的影响.结果表明:根癌农杆菌浓度OD600=0.5,侵染30min,共培养3d,共培养基中添加50μmol/L AS,有利于获得较高的遗传转化效率.在PPT浓度为0.5mg·L-1的分化培养基中筛选到4株抗性植物,经PCR检测初步表明目的基因已经整合到扶芳藤基因组中.
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