宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄卷叶伴随病毒的多重RT-PCR检测

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宁夏贺兰山东麓地区由于其独特的光、热、水、土等自然条件,是目前国内外公认的最佳酿酒葡萄产区之一,现已成为我国酿酒葡萄原产地保护区之一。葡萄病毒病是一类为害地域广而且难以治愈的病害,其中,葡萄卷叶病是宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄产区的重要病害之一,感染卷叶病的植株中最常见的病原分离物是葡萄卷叶伴随病毒(Grapevine leafroll associated virus,GLRaVs)。研究发现,已有12种GLRaVs可以引起该病害,而这些病毒的单一侵染或复合侵染都会引起葡萄卷叶病的发生,给葡萄产业带来了极大的威胁。本研究调查了宁夏贺兰山东麓不同酿酒葡萄产区卷叶病毒病的田间发生状况,发现葡萄卷叶伴随病毒感染的主要品种是蛇龙珠、霞多丽,该病于7月中下旬在田间陆续可见病害症状,之后逐渐加重,8月下旬至9月葡萄成熟时症状表现最为明显,其病株率可达到53%,该症状因品种、年份、环境条件的不同而各异。并针对不同产区不同品种的酿酒葡萄进行了RT-PCR检测,在单一RT-PCR的基础之上,对5种葡萄卷叶伴随病毒GLRaV1,GLRaV 2,GLRaV 3,GLRaV 4,GLRaV5的多重RT-PCR的模板浓度、引物浓度和退火温度进行优化,建立多重RT-PCR检测方法,实现对多种病毒的同时快速检测,这对葡萄卷叶病的检测和诊断具有重要意义,对提高葡萄产量、浆果品质和葡萄酒酒质尤为重要,从而给葡萄产业带来巨大的经济效益。
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