Trizol 法提取人脑胶质母细胞瘤细胞系 U251、TJ861、TJ905、TJ899和 A172以及星形细胞瘤细胞系 H4细胞的总 RNA 并寓集 miRNA,晶芯®哺乳动物 miRNA 微阵列芯片杂交, 扫描后 SAM 分析差异表达的 miRNA。在胶质瘤细胞系中 hsa-miR-221、hsa-miR-222等8种 miRNA 一致表达上调;包括 hsa-miR-1等18种 miRNA 一致表达下调。脂质体共转染反义寡聚核苷酸 (反义 miR-221/222)下调 U251人脑胶质瘤细胞系 miR-221、miR-222的表达。使用 northern blot 方法鉴定转染后 U251细胞 miR-221、miR-222表达水平变化;Matrigel 基质生长实验及 Transwell 实验检测转染后 U251细胞侵袭生长能力;ELISA 评测转染后 U251细胞培养基中 MMP2 和 MMP9含量变化;Western blot 分析 TIMP3、MMP2和 MMP9蛋白的表达变化。Northern blot 显示反义 miR-221/222共转染组使 miR-221、miR-222的表达水平明显下降。反义 miR-221转染组仅使 miR-221的表达水平明显下降,反义 miR-222转染组仅使 miR-222的表达水平明显下降。转染无意序列组及对照组的 miR-221、miR-222表达水平没有改变。Matrigel 基质生长实验及 Transwell 实验显示转染后 U251细胞侵袭生长能力明显下降。ELISA 显示转染后 U251 细胞培养基中 MP2和 MMP9含量明显低于其余四组,而反义 miR-221组、反义 miR-222组的 U251 细胞培养基中 MP2和 MMP9含最低于对照组和转染无意序列组。Western blot 显示反义 miR-221/222共转染组的 TIMP3蛋白表达明显上调,而 MP2和 MMP9蛋白表达明显下降。因此, 反义 miR-221/222通过上调 TIMP3抑制胶质瘤细胞 U251的侵袭能力。