【摘 要】
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目的:探讨超声辐照促进EGFP转染至293T细胞的最佳条件.方法:将293T细胞种植于24孔板内,细胞密度1.5×105/孔,24h后更换为转染液进行超声辐照.根据辐照条件分别优化输出功率、辐照时间、微泡浓度.质粒浓度固定选择15 μ g/mL;输出功率选择1.5w/cm2、2.0w/cm2、2.5w/cm2;辐照时间选择30s、45s、60s;微泡浓度选用20％、30％、40％.转染液为EGFP
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院超声科
【出 处】
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第二十四届长城国际心脏病学会议、亚太心脏大会暨国际心血管病预防与康复会议(The 24th Great Wall Int
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目的:探讨超声辐照促进EGFP转染至293T细胞的最佳条件.方法:将293T细胞种植于24孔板内,细胞密度1.5×105/孔,24h后更换为转染液进行超声辐照.根据辐照条件分别优化输出功率、辐照时间、微泡浓度.质粒浓度固定选择15 μ g/mL;输出功率选择1.5w/cm2、2.0w/cm2、2.5w/cm2;辐照时间选择30s、45s、60s;微泡浓度选用20％、30％、40％.转染液为EGFP、微泡、Opti-MEM的混合液,总体积为1ml,微泡选用sonovue,EGFP质粒浓度为1 μ g/μ l.辐照仪器为超声基因转染仪,辐照后4h更换为不含抗生素含血清的DMEM培养基.
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