大鼠POA神经元精氨酸加压素受体、GABAA受体和NMDA受体亚单位的鉴定研究

来源 :四川省生理科学会第十二届学术交流会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jenniechen007
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  目的:总所周知,下丘脑视前区(POA,preoptic area)与体温调节活动有非常密切的关系.研究发现在POA 神经元有对局部温度变化敏感的热敏、冷敏神经元,以及温度不敏感神经元.精氨酸加压素(AVP)作为一种重要的内源性降温物质,参与了正常体温调节和退热过程.我们以前的研究发现,AVP 可以影响POA 神经元的自发放电活动,从而参与体温调节.这种影响可能与AVP 调制POA 神经元的突触传递有关.为此,我们观察了精氨酸加压素受体、GABAA 受体和NMDA 受体亚单位在大鼠POA 神经元的表达.方法:实验用成年雄性SD 大鼠,体重250-290g.4%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后立即取脑,修块后取双侧POA进行下一步RT-PCR 和West Blot 实验.部分SD 大鼠4%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后进行多聚甲醛预灌注,石蜡包埋后切片进行免疫组化或者免疫荧光实验.结果:实验结果如下:①免疫组化实验表明在大鼠POA 区有AVP V1a 受体阳性表达细胞;免疫荧光实验也证明在POA 神经元,存在AVP V1a 受体和NMDA受体2A 亚单位的共表达.②RT-PCR 实验提示POA 区有AVP V1a 受体mRNA 的表达,但没有AVP V1b 和V2 受体的表达;NMDA 受体有2A 和2B 亚单位mRNA 表达;GABAA 受体表达的是α1,α2,α3,β2,β3 和γ2 亚单位.(3)West Blot实验进一步证实在POA 区存在AVP V1a 受体以及NMDA 2A 和2B 亚单位蛋白的表达.结论:本研究通过RT-PCR 和West Blot 实验证明在大鼠POA 区存在AVP V1a受体、NMDA 受体2A、2B 亚单位以及GABAA 受体α1,α2,α3,β2,β3 和γ2亚单位的表达.免疫组化和免疫荧光实验提示,V1a 受体和NMDA 受体2A 亚单位共表达在POA 神经元.这为证明AVP 通过激活V1a 受体从而调制POA 神经元突触传递这一假说提供了一定的实验依据.
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