金黄色葡萄球菌是一种人畜共患菌,也是奶牛乳房炎主要致病因之一.以往研究证明,金葡菌FnBPA和Trap蛋白作为免疫原在小鼠的攻毒试验中具有免疫保护性作用.α-溶血素(α-h1a)作为金葡菌在侵染过程中一种外分泌蛋白,其免疫优势片段也具有良好的免疫保护性作用;本研究拟对上述三种蛋白进行融合表达,研发一种新型亚单位嵌合疫苗,为金葡菌感染的协同防控奠定基础. 本研究采用Trap全蛋白、FnBPA的免疫优势片段FL和α-溶血素免疫优势片段hlaD，通过人工构建肽段Linker用overlap-PCR方法将三个目的片段串联，之后连入pET32a表达载体进行表达，获得的融合蛋白命名为TAF(Trap-hIaD-FL)。实验结果表明，TAF重组蛋白在小鼠模型中具有很好的免疫保护性作用，明显优于其他各对照实验组，在肺部攻毒试验中对S.aureus Newman株和HLJ123-1株的保护率分别达到100％和90％;在腹腔攻毒试验中对S.aureus Nemnan株和HLJ23-1株的保护率分别达到90％和80％;而各免疫组中的混合蛋白组，攻毒后免疫保护率不到50％。TAF实验组中检测的干扰素-γ，白介素-2，白介素-4，白介素-17高于其他各实验组。以上研究结果表明，TAF融合蛋白具有很好的免疫原性，能有效的抑制金葡菌感染，为今后研究多结构域的亚单位嵌合疫苗提供一定参考。