目的:研究SD大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)的培养方法及其生物学特性.方法:实验动物:SD大鼠,雄性,80-100g.组织块贴壁法培养:SD大鼠腹腔麻醉后取胸腹主动脉,置入加入10％牛清的DMEM培基中,去除外膜及结缔组织,纵向剖开,纱布轻擦内皮细胞破坏内膜为关键点,中膜剪碎成1mm3左右小块接种于培养瓶底部,加入1ml培基,倒置放于37℃95％CO2孵箱中培养,3-4h后培养瓶细胞面朝下正置,每2-3天换液,至细胞呈单层汇合后进行传代.利用平滑肌细胞优势生长进行自然纯化,并用倒置相差显微镜观察、HE染色及瑞士-姬姆萨染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定.结果及结论：组织块贴壁法培养时，血管经内膜破坏处理后进行的平滑肌细胞贴壁培养使中膜平滑肌细胞直接贴壁，细胞爬出时间更短，生长更快，内膜剥离对VSMCs贴壁培养的成功至关重要，且培养和纯化可同步进行，具有简便易行、细胞损失小、培养周期短等优点。