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目的:研究PINK1-Par-kin介导的线粒体自噬在阿霉素(Doxorubicin,DOX)致人心室肌细胞(AC16)线粒体损伤中的作用。方法:分别用不同浓度DOX处理AC16细胞24h。检测DOX对细胞存活率、线粒体内活性氧(ROS)水平、线粒体膜电位、线粒体DNA拷贝数的影响,以及DOX对线粒体自噬相关信号通路(PINK1-Parkin通路)及相关分子蛋白表达水平的影响;采用线粒体内ROS清除剂Mito-tempo,清除线粒体内ROS,探讨ROS在PINK1-Parkin介导的线粒体自噬调控对抗DOX线粒体损伤中的作用:采用线粒体自噬抑制剂Mdivi-1抑制线粒体自噬,研究PINK1-Parkin信号通路在介导线粒体自噬调控抵抗DOX线粒体损伤过程中的作用。结果:(1)DOX以浓度-依赖性的方式降低AC16细胞存活率;(2)随着DOX浓度的增加,线粒体内ROS水平升高,线粒体膜电位降低,线粒体DNA拷贝数减少;(3)DOX降低线粒体新生相关蛋白PGC-1α,NRF1,TFAM,VDAC和COXⅣ蛋白表达水平,抑制线粒体新生;(4)DOX对自噬相关蛋白表达水平的影响:DOX降低p62蛋白表达水平,增加Beclin1蛋白表示水平,同时增加LC3Ⅱ蛋白表达水平,诱导AC16细胞发生自噬;(5)DOX促进PINK1和Parkin的线粒体转位,增加线粒体内PINK1和Parkin蛋白表达水平,激活PINK1-Parkin通路,促进线粒体自噬的发生;(6)线粒体ROS清除剂Mito-tempo可以缓解DOX引起的心肌细胞毒性,减轻DOX诱导的线粒体自噬的发生;(7)抑制线粒体自噬可以缓解DOX引起的心肌细胞毒性,降低线粒体内ROS水平,上调线粒体新生通路PGC-1α信号通路相关蛋白的表达。结论:(1)DOX通过激活PINK1-Parkin信号通路,促进线粒体自噬的发生,抑制PARIS-PGC-1α信号通路,抑制线粒体新生,诱导线粒体毒性的发生;(2)ROS在PINK1-Parkin介导的线粒体自噬调控对抗DOX线粒体损伤中的发挥重要作用;(3)PINK1-Parkin信号通路在介导线粒体自噬调控抵抗DOX线粒体损伤过程中的具有重要作用,线粒体自噬的抑制可以通过改善线粒体新生功能而减轻DOX引起的心肌细胞线粒体毒性。