【摘 要】
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[目的]研究抗氧化性丝素蛋白(Silk Fibroin,SF)水解物减弱过氧化氢在人肺癌A549细胞造成的损伤,并研究SF是通过何种途径来减弱损伤的.[材料和方法]用不同浓度50,100,200,400,600,800,1000umol/L H2O2预处理A549细胞24h,测定细胞存活率和脂质过氧化物(MDA),选择适宜浓度的H2O2处理细胞.不加任何药物处理的为空白对照组,实验组分为H2O2预
【机 构】
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苏州大学大学医学部公共卫生学院毒理系,苏州
【出 处】
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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
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[目的]研究抗氧化性丝素蛋白(Silk Fibroin,SF)水解物减弱过氧化氢在人肺癌A549细胞造成的损伤,并研究SF是通过何种途径来减弱损伤的.[材料和方法]用不同浓度50,100,200,400,600,800,1000umol/L H2O2预处理A549细胞24h,测定细胞存活率和脂质过氧化物(MDA),选择适宜浓度的H2O2处理细胞.不加任何药物处理的为空白对照组,实验组分为H2O2预处理组,H2O2预处理+10mg/mL SF治疗组,H2O2预处理+20mg/mL SF治疗组,H2O2预处理+30mg/mL SF治疗组,H2O2预处理+50mg/mL SF治疗组.选择抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)作为阳性对照,H2O2预处理+5mmol/L NAC治疗组.测定各组细胞存活率和MDA含量,同时测定各组超氧化物岐化酶(Superoxide Dismutase,SOD),过氧化氢酶(Catalase,CAT)的含量和总抗氧化能力(Total Antioxidant Capacity,T-AOC).[结果]随着H2O2浓度的增加细胞存活率降低,当H2O2的浓度达到600umol/L细胞存活率达到45.71±1.56％ (p＜0.05),而且随着H2O2的浓度增加细胞中MDA含量也增加,表明过氧化氢刺激细胞发生氧化应激使脂质氧化水平增加,当H2O2的浓度达到600umol/L细胞中MDA含量达到61.85±2.1 (nmol/mg pro) (p＜0.05),处于一个较高的水平.综合这两个因素选择600umol/L的H2O2刺激细胞产生氧化损伤.发生氧化损伤后用SF治疗24h,细胞的存活率有增高的趋势,且与SF的浓度成依赖关系.50mg/mL时存活率为65.52±2.87(p＜0.05),较氧化损伤组有较大的提高.而且只加SF对细胞存活率没影响,没有统计学差异,表明这些浓度的SF对细胞本身是没毒性的.加入SF治疗组中MDA都呈现下降的趋势,且都有统计学意义.用H2O2诱导细胞氧化损伤,SOD,T-AOC,CAT水平与比空白组相比都降低,含量分别是11.73±0.64 (U/mg pro),15.81±4.15U/mg pro),2.54±0.21 (mmol/g),差异具有统计学意义(p＜0.05).加入SF治疗后这三种酶含量都增加了,而且与SF的浓度有依赖性关系,SF含量为50mg/mL时含量分别增加为27.39±1.78 (U/mg pro),55.04±1.15U/mg pro),8.43±0.09 (mmol/g),差异具有统计学意义(p＜0.05).而且对抗氧化酶活力恢复都比阳性对照NAC组效果好.[结论]SF对H2O2引起的549细胞氧化应激造成的损伤具有恢复作用,可以提高细胞的抗氧化能力,从而为药物预防和治疗急性肺损伤提供新思路.
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