枣MAPKKK家族基因鉴定及其响应枣疯病表达分析

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枣疯病是由植原体侵染引起的强传染、难治愈、高致死性重大病害。MAPK(Mitogen Activated Protein Kinase)级联途径在植物免疫应答过程中起重要作用。为探究MAPK级联途径对枣疯病的响应机制,前期对枣MAPK和MAPKK基因家族进行了鉴定,并发现其中的一些关键基因在枣树响应植原体侵染过程中发挥重要功能。在侵染过程中枣MAPKK如何被MAPKKK调控尚不清楚。因此,本研究中对枣中MAPKKK基因家族进行鉴定,并对其响应枣疯病进行表达分析,为解析枣中MAPKKK基因家族响应植原体侵染的分子机制提供依据。以冬枣(Ziziphus jujuba Mill.‘Dongzao’)患枣疯病叶片、健康叶片和患枣疯病组培苗、健康组培苗为试材,基于枣基因组数据,利用生物信息学分析方法对枣MAPKKK基因进行鉴定以及染色体定位、基因结构、复制和聚类分析,并通过qRT-PCR技术对其响应枣疯病进行表达模式分析。在枣基因组中共鉴定出56个MAPKKK基因,并根据其在染色体中的位置进行命名。该56个MAPKKK基因分布在枣12条染色体上且其所对应氨基酸序列均含有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(S-TKC)保守结构域。系统进化分析表明,枣MAPKKK基因家族可以被分为两个亚家族,其中41个基因属于Raf亚家族,15个基因属于MEKK亚家族。另外,每个亚家族中的MAPKKK基因都具有相同的保守序列和基因结构,其中MAPKKK15/16基因是位于第5号染色体上唯一的串联重复序列。进一步qRT-PCR分析发现,在冬枣患病叶片中,枣MAPKKK26和45显著上调,MAPKKK3/43/50呈下调趋势。而在患枣疯病组培苗中枣MAPKKK4/10/25和44显著表达,MAPKKK7/30/35/37/40/41/43和46明显下调,表明这些基因在枣树响应植原体侵染过程中发挥重要作用。
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