【摘 要】
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由于核酸探针设计的限制或"phase模棱两可",目前HLA DNA分型技术如测序(SBT)和探针杂交法(SSO)一般都会产生模棱两可结果.这里我们描述了应用新一代测序仪(NGS)基于单分子序
【机 构】
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Division of Basic Medical Science and Molecular Medicine, Department of Molecular Life Science,Tokai
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由于核酸探针设计的限制或"phase模棱两可",目前HLA DNA分型技术如测序(SBT)和探针杂交法(SSO)一般都会产生模棱两可结果.这里我们描述了应用新一代测序仪(NGS)基于单分子序列的8位数水平的HLA位点分型技术(SS-SBT)的开发和应用.新一代测序仪可以区分单个核酸碱基差别的HLA等位基因人们期望以此可以解决"phase模棱两可的问题.8个经典HLA位点特异PCR引物将整个基因序列从增强启动区至3端未翻译区扩增出来后.HLA-A,-B,-C,-DRB1和-DQB1的"Phase模棱两可"被完全解决,并且明确地指定了唯一的等位基因.因此,这种所描述的SS-SBT分型方法是一种优越的,有效的HLA分型技术.该技术可以有效地,没有模棱两可地检测新等位基因和沉默基因(null allele).
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