【摘 要】
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本文对重组细胞色素P450BM-3基因工程菌的培养条件进行了单因素优化,确定了较佳的培养条件:接种量1%,装液量100mL/500mL,发酵培养基加入0.1mg·L-1FeCl3,OD578达到1.0左右时升
【机 构】
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浙江大学化学工程与生物工程学系,杭州,310027
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本文对重组细胞色素P450BM-3基因工程菌的培养条件进行了单因素优化,确定了较佳的培养条件:接种量1%,装液量100mL/500mL,发酵培养基加入0.1mg·L-1FeCl3,OD578达到1.0左右时升温至42℃诱导,诱导时间为5小时.用ResourceQ阴离子层析介质对菌体破胞液进行了初步的纯化,通过KTAexplorer100对其洗脱条件进行了优化,结果表明:0.3mol·L-1、0.5mol·L-1的两步NaCl阶跃洗脱,P450BM-3纯度较高,活性收率为30.1%,纯化倍数为2.12.
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