【摘 要】
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目的:探究不同线性增加速度的单向流体剪应力(FSS)调控骨髓间充质干细胞(BMSCs)朝骨和软骨向的分化机制.方法:(1)采用全骨髓悬液直接贴壁法获取6周龄SD大鼠BMSCs,细胞经传代培养至第3、4代用于实验;(2)将BMSCs接种在玻璃载玻片上,运用平板流动腔对其施加3种FSS 20 min,分别是从开始的0 min,在0、2和20 min内以线性速度从0 dyn/cm2增加到10 dyn/c
【机 构】
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重庆大学生物工程学院,重庆400044
【出 处】
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第十一届全国生物力学学术会议暨第十三届全国生物流变学学术会议
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目的:探究不同线性增加速度的单向流体剪应力(FSS)调控骨髓间充质干细胞(BMSCs)朝骨和软骨向的分化机制.方法:(1)采用全骨髓悬液直接贴壁法获取6周龄SD大鼠BMSCs,细胞经传代培养至第3、4代用于实验;(2)将BMSCs接种在玻璃载玻片上,运用平板流动腔对其施加3种FSS 20 min,分别是从开始的0 min,在0、2和20 min内以线性速度从0 dyn/cm2增加到10 dyn/cm2(以0-0、0-2、0-20简化表示),在NO检测时采用10 dyn/cm2继续加载至1 h;(3)在荧光显微镜下,实时观测记录经Fura-4染色的BMSCs在加载过程中细胞内钙离子的响应并进行图像处理;对加载后BMSCs的F-atin染色,并对其连续F-atin的密度进行定量分析;在1h加载过程中的不同时问点取培养液,测试NO浓度;加载结束并在静态条件下继续培养48 h后,测试BMSCs中骨向分化标志物碱性磷酸酶(ALP)和软骨向分化标志物糖胺聚糖(GAG)的表达;(4)对照组为接种在玻璃载玻片上不加载的静态培养BMSCs.
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