【摘 要】
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目的 研究不同晶型纳米TiO2诱导滑膜细胞RSC-364凋亡.方法 本文使用的材料为锐钛矿和金红石纳米TiO2颗粒,材料悬液浓度为30和300 mg·L-1,分为5组进行实验(含对照组).实
【机 构】
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北京航空航天大学生物与医学工程学院,北京100191
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目的 研究不同晶型纳米TiO2诱导滑膜细胞RSC-364凋亡.方法 本文使用的材料为锐钛矿和金红石纳米TiO2颗粒,材料悬液浓度为30和300 mg·L-1,分为5组进行实验(含对照组).实验采用Calcein-AM/PI荧光染色法和Annexin Ⅴ-FITC/PI荧光染色法定性分析了锐钛矿和金红石纳米TiO2诱导滑膜细胞凋亡的情况；借助流式细胞技术,定量分析了纳米材料诱导细胞凋亡的程度；并且,利用透射电镜观察了纳米TiO2诱导细胞凋亡的形态学变化.结果 Calcein-AM/PI荧光染色实验显示,纳米材料刺激后,细胞活性下降,死细胞数量增多,另外显微镜下可观察到细胞结构破坏、细胞内容物外泄现象.Annexin Ⅴ-FITC/PI荧光染色实验观察到了各实验组纳米TiO2颗粒均诱导了滑膜细胞凋亡,并且高浓度的纳米TiO2能够诱导更多的细胞凋亡和坏死.流式细胞术定量分析发现,300 mg·L-1锐钛矿和金红石纳米TiO2诱导的细胞晚期凋亡及坏死,其比率分别达到了(12.21±1.44)％和(7.89±1.78)％,显著高于30 mg· L-1纳米颗粒组的(5.39±0.92)％和(3.46±0.52)％.在透射电镜下,能够看到纳米颗粒在细胞内呈集中分布,并且刺激后的细胞可观察到明显的凋亡形态学特征,如细胞皱缩、染色质边集、形成凋亡小体等.结论 钛矿和金红石纳米颗粒均存在细胞毒性,锐钛矿型纳米颗粒的细胞毒性要高于金红石型纳米颗粒,这可能与锐钛矿纳米颗粒能够产生更多的ROS有关.
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