蛋鸡α-干扰素基因的克隆与在大肠杆菌的高效表达与复性研究

来源 :中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guanyuefei
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根据GeneBank中鸡IFN-α基因设计引物对,利用PCR技术克隆并测定了莱航鸡(SPF)的IFN-α基因,定名为ChIFN-Sl,与GeneBank中IFN-α比较,ORF长度均为582个核苷酸,其成熟肽包含162个氨基酸,相互间同源性在98.8﹪~99.8﹪.将其成熟肽基因序列克隆入pQE30表达载体后,通过ITPG诱导,收集菌体超声波破碎后提取包涵体并进行初步纯化,利用胱氨酸-半胱氨酸再氧化法对纯化后的包涵体变性液进行分段稀释法复性.细胞病变抑制法(CEF-VSV为基本检测系统)测定复性液的抗病毒比活性高达108单位/mg以上.
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