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目的 探讨EPO 对ICH 的保护作用是否与调节AQP4 的表达有关.方法 通过自体血5 μl 注入尾状核的方法建立ICH 模型,于造模后腹腔注射重组人EPO(recombinant human,rhEPO) 5000 IU/d,连续3 d,用免疫荧光和Western blot 法观察正常纹状体及ICH 后血肿周围AQP4 蛋白表达.并分别用干湿重法,伊文思蓝(Evan’sblue,EB) 法,神经功能缺损评分及TUNEL 染色法观察rhEPO对野生型(AQP4+/+) 及AQP4 基因敲除(AQP4-/-) 小鼠正常状态及ICH 后血肿周围脑组织含水量、血脑屏障((bloodbrainbarrier,BBB) 通透性、神经功能及细胞凋亡的影响.并在离体培养的星形胶质细胞中加入rhEPO 及C-Jun 氨基末端激酶(C-Jun amino-terminal kinase,JNK) 抑制剂SP600125,细胞外信号调节激酶(extracellular signalregulatedkinase,ERK) 抑制剂U0126,p38-丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK) 抑制剂SB239063,磷脂酰肌醇-3 激酶(phosphatidylinositol3’-kinase,PI3K) 抑制剂Ly294002,分别于加药后2 d用Western blot 和免疫荧光法检测AQP4 蛋白的表达.结果 rhEPO 可使正常纹状体及ICH 后血肿周围AQP4 蛋白表达明显增加(p＜0.01).AQP4 基因敲除可加重ICH 后血肿周围脑组织含水量、EB 渗漏、神经细胞凋亡及神经功能缺损.连续3 d 腹腔注射rhEPO 对AQP4+/+ 和AQP4-/-小鼠均可在ICH 后发挥减轻血肿周围脑水肿(82.41±0.72％ vs.79.87±0.96％,p＜0.01；83.58±0.88％ vs.81.78±0.61％,p＜0.01)、减少血肿周围EB 渗漏(μg/mg)(10.03±0.83vs.7.36±0.65,p＜0.01；11.36±0.98 vs.8.35±0.63,p＜0.01)、降低神经功能评分(8.00±0.89 vs.6.67±0.82,p＜0.05；9.33±1.03 vs.8.17±0.41,p＜0.05)及减少血肿周围TUNEL 阳性细胞数量(30.50±3.62 vs.14.67±3.67,p＜0.01；39.50±4.46 vs.23.33±4.72,p＜0.01) 的作用.rhEPO 减少ICH 后AQP4+/+ 小鼠脑含水量、神经功能评分及TUNEL 阳性细胞数量的百分比均显著高于AQP4-/-小鼠(p＜0.05),而rhEPO 减少血肿周围EB 含量的百分比在两组小鼠无明显差异.Western blot 及免疫荧光均显示,rhEPO 可使离体培养的星形胶质细胞AQP4 蛋白表达显著增加(p＜0.01),该效应可被SP600125 和SB239063 抑制(p＜0.01),但不能被U0126 或Ly294002 所抑制.结论 EPO 可通过激活p38-MAPK 及JNK 通路,上调ICH 后AQP4 的表达.该效应参与EPO 对ICH 后脑水肿、神经功能缺损及细胞凋亡的保护作用.本实验的结果可为ICH 后脑水肿的治疗提供新的作用靶点.