体液外泌体的蛋白质组学分析与癌症检测

来源 :第21届全国色谱学术报告会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:snake_9655
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人体血清和唾液中的蛋白质已广泛用于临床检测,特别是癌症的筛查和诊断,但现有的体液蛋白标志物特异性不高.体液中含有大量的循环外泌体,往往携带与癌症相关的生物信号分子,已日益成为癌症早期检测和治疗的新靶标.针对体液中循环外泌体丰度低、背景干扰严重的问题,有必要建立标准化的分离分析方法,促进循环外泌体的定量蛋白质组学研究和应用.为分离富集血清和唾液中的循环外泌体,利用淀粉和唾液淀粉酶的特异性结合去除唾液中的高丰度蛋白和粘蛋白,采用血清高丰度蛋白去除试剂盒进行样品前处理,经电镜分析、纳米粒径分析、表面特征标志物分析和凝胶电泳分析,证实分离提纯到了体液外泌体.和传统的提取方法相比,本研究建立的方法能够提高体液外泌体的富集效率,显著减少体液中高丰度蛋白的干扰。对得到的循环外泌体进行定量蛋白质组学分析,从血清外泌体和唾液外泌体中分别鉴定到994和319个蛋白。为探索循环外泌体蛋白在癌症检测中应用,系统比较了肺癌患者和健康人群在血清和唾液外泌体蛋白质组上的差异。经过定量蛋白组学分析,在两种体液中都发现了11个与肺癌相关的外泌体蛋白,证实体液外泌体及其蛋白质可以用于癌症检测。经过验证,这些体液外泌体蛋白有望成为癌症无创筛查和诊断的特异性标志物。
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