转EBF合成酶基因小麦的目的基因检测

来源 :中国植物保护学会第十一次全国会员代表大会暨2013年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dxlwwh
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  麦蚜是我国小麦生产中的重要害虫之一,通常造成小麦减产10%以上,严重时可高达60%.目前,生产上麦蚜防治以化学防治为主,由于农药使用不当造成的残留、抗药性及环境污染等问题日益突出.利用转基因工程培育抗蚜小麦品种成为减少化学农药使用的重要途径之一.当蚜虫被天敌捕食或遭遇其他干扰时会释放蚜虫报警信息素,引起同种其他个体骚动、逃散或从植株上脱落;同时,可以被一些蚜虫天敌识别,作为寻找蚜虫的线索.大多数蚜虫的报警信息素活性成分是E-β-farnesene (EBF).EBF也是许多植物次生代谢产物之一.因此,利用转基因技术将EBF合成酶基因引入小麦中,通过植物释放EBF驱避蚜虫的同时引诱天敌可以达到控制蚜虫为害的目的.本研究分别从DNA和RNA水平对12个品系转EBF合成酶基因小麦和转基因受体小麦KN199进行检测,鉴定阳性植株.PCR反应条件为:预变性94℃ 5min,变性94℃30s,退火56℃30s,延伸72℃ 45s,40个循环,72℃10 min.检测结果显示,处于苗期的2个转基因小麦品系在DNA及RNA水平均未检测到目的基因;1个品系在DNA水平上检测到目的基因,而在RNA水平上未检测到;其他9个品系则为阳性,即目的基因成功转入小麦受体并获得表达.本研究结果为进一步在生理水平验证小麦EBF的释放及转EBF合成酶基因小麦对麦蚜及其天敌行为及生理水平的影响奠定基础.
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