【摘 要】
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兰花是花卉产业最重要的观赏植物之一,近年来,随着兰花产业的迅速发展,兰花国际国内贸易和种质交流都十分频繁,一旦感染病毒,兰花的观赏价值和经济价值将受严重影响.建兰
【机 构】
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华南农业大学资源环境学院,广州510642
【出 处】
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中国植物病理学会2014年学术年会
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兰花是花卉产业最重要的观赏植物之一,近年来,随着兰花产业的迅速发展,兰花国际国内贸易和种质交流都十分频繁,一旦感染病毒,兰花的观赏价值和经济价值将受严重影响.建兰花叶病毒(cymbidium mosaic virus,CymMV)和齿兰环斑病毒(odontoglossum ringspot virus,ORSV)是为害兰花的两种主要病毒,建立这两种病毒高效检测方法对兰花生产有重要意义.本研究建立了CymMV和ORSV RT-LAMP检测方法,并对RT-LAMP检测体系中模板浓度、镁离子浓度、温度、扩增时间进行了探讨,结果发现,这两种病毒RT-LAMP检测体系中最适宜的RNA模板浓度为0.5mg/μL.RT-LAMP检测体系中不同镁离子浓度(8～ 12mmol/L)下能检测到CymMV,但最适宜的镁离子浓度为8mmol/L；而镁离子浓度只有在8mmol/L时才能检测到ORSV.RT-LAMP扩增时间为45min、60min、75min和90min时都能检测到CymMV,最适宜的扩增时间为90min；扩增时间为60min、75min和90min均能检测到ORSV.RT-LAMP扩增温度为52℃、54.4℃、56.8℃、59℃和60℃下都能检测到CymMV,而扩增温度为56.8℃、59℃和60℃时均可以检测到ORSV,CymMV和ORSV最适宜的RT-LAMP扩增温度均为60℃.该研究结果可应用于侵染兰花的CymMV和ORSV高效和快速检测,以防止这两种兰花病毒的扩散蔓延,为我省兰花工业化生产提供保障.
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