【摘 要】
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利用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)方法克隆草鱼肠道y+L
【机 构】
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华中农业大学水产学院,武汉430070
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会
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利用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)方法克隆草鱼肠道y+LAT1基因的全长cDNA序列.结果表明,y+ LAT1基因的全长cDNA序列为2 688bp,含1 506bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),5非翻译区(5-untranslated regions,5-UTR)为319bp,3 非翻译区(3 -untranslated regions,3-UTR)为863bp,编码501个氨基酸.y+LAT1基因全长cDNA序列编码的氨基酸序列与斑马鱼的同源性高达95％,与哺乳类动物和两栖类动物的同源性在75％～80％.构建的氨基酸系统进化树结果与传统形态学分类相一致.预测发现草鱼肠道y+ LAT1蛋白无信号肽,有一个糖基化位点,三个磷酸化蛋白激酶C位点和11个跨膜域,这些与斑马鱼该蛋白的结构是一致的.草鱼肠道碱性氨基酸转运载体y+ LAT1基因全长cDNA序列的获得为研究鱼类氨基酸的吸收与代谢,氨基酸水平与基因表达的关系以及基因表达对鱼类机体各个系统的调控机制提供理论基础.
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