【摘 要】
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目的:用MTT比色法评价细胞毒阳性参照样品(ZDEC-PU和ZDBC-PU)在不同浸提条件下的体外细胞毒性,并探讨MTT法中两种细胞毒性阳性参照样品的适用性. 方法:参照标准ISO 10993-
【机 构】
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中国食品药品检定研究院,北京 100050
【出 处】
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第二届生物材料与组织工程产品质量控制国际研讨会
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目的:用MTT比色法评价细胞毒阳性参照样品(ZDEC-PU和ZDBC-PU)在不同浸提条件下的体外细胞毒性,并探讨MTT法中两种细胞毒性阳性参照样品的适用性.
方法:参照标准ISO 10993-5:2009的细胞毒性试验评价要求,选用两种浸提介质(含血清和不含血清培养液)浸提参照样品,用浸提原液及其稀释液培养L929细胞,显微镜下观察细胞形态的改变,MTT比色法量化细胞毒性,计算相对活性(增殖率).
结果:ZDEC-PU在含血清和不含血清培养液的浸提条件下,浸提原液均显示重度细胞毒性,但在两浸提条件下80％稀释液组间、60％稀释液组间和40％稀释液组间细胞毒性均有显著性差异(P＜0.05).ZDBC-PU在含血清培养液的浸提条件下显示重度细胞毒性,在不含血清培养液的浸提条件下ZDBC-PU的浸提原液几乎未显示细胞毒性.
结论:浸提介质对两参照样品的细胞毒性有影响,两参照样品的含血清培养液的浸提液较不含血清培养液的浸提液显示出更大的细胞毒性,均呈现4级细胞毒性.所以选用含血清培养液作为浸提介质时,两参照样品均可应用于MTT试验作为4级细胞毒性参照样品;而选用不含血清培养液作浸提介质时,可选择ZDEC-PU作为4级细胞毒性参照样品.
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