大蒜(Allium ativum L.)由于以无性繁殖为主,造成了病毒的长年积累,种性退化,严重影响了其产量和品质。通过设计病毒特异性引物,建立了3种大蒜病毒的RT-PCR检测体系,并应用该体系对不同组织繁殖材料进行了病毒检测。此技术为大蒜品种的病毒检测和脱毒快繁过程中病毒的监测提供了快速有效的方法。以洋葱黄矮病毒(OYDV)、韭葱黄条纹病毒(LYSV)、青葱潜隐病毒(SHLV)为研究对象,设计特异性RT-PCR引物,建立病毒快速检测技术。对‘永年大蒜’、‘中牟大蒜’、‘特选17’、‘特选141’、‘特选361’和‘特选261’经过组培快速繁殖形成的材料——茎尖组培苗、愈伤组织、愈伤再生苗、再生微型蒜进行病毒检测。1.洋葱黄矮病毒(OYDV)特异性引物预期产物的大小为401 bp,对茎尖组培苗、愈伤组织、愈伤再生苗、再生微型蒜进行检测表明:愈伤组织感病为5.26%,蒜茎尖组培苗感病率为23.1%。因此,通过愈伤组织形成的组织后代对洋葱黄矮病毒(OYDV)的脱毒效果最好。2.韭葱黄条纹病毒(LYSV)特异性引物预期产物的大小为455 bp。对组培快繁材料检测结果表明:愈伤组织的感病为零,茎尖组培苗的感病率为53.8%。因此,大蒜愈伤组织对韭葱黄条纹病毒(LYSV)的脱毒效果最好。3.青葱潜隐病毒(SHLV)的特异性条带为476 bp。对组培快繁材料检测结果表明:愈伤组织的感病率为零,茎尖组培苗的感病率为46.2%。因此,通过愈伤组织形成的组织后代对青葱潜隐病毒(SHLV)的脱毒效果是最好的。为了进一步验证结果的可靠性,对目标片段进行测序,经过比对结果表明本试验中OYDV、LYSV、SHLV的目标片段与GenBank中已经公布的相应病毒序列同源性都高达95%以上,特异性引物的特异性和PCR体系可靠性得到了进一步验证。