【摘 要】
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分别构建了O型口蹄疫病毒China99株结构蛋白VP1基因及结构蛋白前体P1-2A、非结构蛋白3C及部分2B基因(P1-2X3C)的植物表达载体,分别命名为pBin438/VP1及pBin438/P1-2X3C,通过
【机 构】
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中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点实验室,甘肃兰州,730046
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分别构建了O型口蹄疫病毒China99株结构蛋白VP1基因及结构蛋白前体P1-2A、非结构蛋白3C及部分2B基因(P1-2X3C)的植物表达载体,分别命名为pBin438/VP1及pBin438/P1-2X3C,通过农杆菌介导法转化番茄,对获得的卡那霉素抗性植株进行分子生物学检测,85％的再生植株PCR检测阳性;RT-PCR结果证实VP1、P1-2X3C基因在转基因番茄中能够有效转录;将ELISA和Western blot检测阳性的转基因番茄叶片蛋白提取液经肌肉途径免疫豚鼠,于第3次免疫后28d用100ID50/0.2mL的同源强毒攻击,结果表明口蹄疫病毒VP1、P1-2X3C转基因番茄的表达产物具有良好的免疫原性,豚鼠3免后血清效价可达1∶64～1∶128,攻毒后两组免疫豚鼠保护率分别达4/5和5/5.
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