弓形虫多表位抗原在大肠杆菌中的可溶性表达和鉴定

来源 :第四届中南地区实验动物科技交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zeroorhero
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:获得弓形虫多表位基因在原核系统中可溶性表达产物,为人兽共患的弓形虫病重组抗原试剂盒的制备及疫苗的研究奠定基础。 方法:以PCR法扩增弓形虫多表位基因(MEG),使其两端带有与载体pET32a相匹配的酶切位点,插入载体pET32a,酶切并测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG进行诱导,以SDS-PAGE对该基因的表达水平、表达产物的可溶性、分子量进行分析和鉴定,以WESTERN-BLOT分析表达产物的免疫反应性。 结果:该基因在原核表达系统中经诱导,得到了31kDa的可溶性融合表达产物。其在菌体总蛋白中所占的比例为58%,经Ni-NTA纯化,纯度可达95%以上.免疫印迹实验表明该产物能够被弓形虫B36感染的小鼠血清和弓形虫RH感染的兔血清特异识别。 结论:弓形虫多表位基因在原核中的可溶性表达产物在弓形虫病诊断及疫苗研究中有潜在的应用价值。
其他文献
目的:观察两种辣椒素受体激动剂辣椒素、姜油酮对大鼠高反应神经性膀胱排尿功能的影响。方法:大鼠行T10横断后造成高反应神经性膀胱后,膀胱给予辣椒素(1mM)、姜油酮(30 mM)后测定尿流动力学改变.结果:膀胱内给予辣椒素后排尿时间延长,排尿量增加,残余尿量增加,膀胱容积增大,膀胱无抑制性收缩程度明显减轻(p<0.05)。而姜油酮无明显影响。结论:姜油酮不宜作为反应性神经性膀胱的治疗物质.
探讨荔枝核对小鼠四氯化碳(ccl4)和硫代乙酰胺(TAA)所引起急性中毒模型。血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性升高有明显的降低作用(P<0.01)。同时对TAA小鼠血清的超氧化物歧化酶(SOD)的活性升高;血清(MDA)含量明显降低.结论荔枝核对小鼠实验性肝损伤有保护作用。
本文通过动物实验,研究了高密度脂蛋白注射液对高脂血症的调理作用。结果表明,HDL注射液对于实验性家兔动脉粥样硬化具有预防和治疗作用,其效果优于洛伐他汀oHDL注射液对于实验性家兔高胆固醇血症具有明显的预防和治疗作用,其血脂调节作用优于洛伐他汀。
目的:观察拉米夫定连续给药后的毒性反应。方法:SD大鼠,口服给予拉米夫定,剂量为100mg/g、1000mg/kg、2000mg/kg,连续给药6个月.观察给药期间大鼠的一般体征,行为活动,大、小便,体重变化,进食量等;分别在给药中间,给药结束和恢复期对部分动物,进行血液学,血液生化和病理组织学检查.结论:拉米夫定剂量低于1000mg/kg,长期口服无明显毒性,剂量为2000mg/kg,虽有一定毒
目的:研究近交系红鲫的遗传特性,建立其遗传概貌.方法:采用活体肾细胞培养法或外周血细胞培养法进行染色体制片,按Levan提出的标准进行染色体组型分析。结果:两种红鲫的染色体数目2n=100,核型公式为22 m+30 sm+24st+24 t,尚未发现雌雄间有异型性染色体及特殊标志染色体。
用福尔马林病理疼痛模型观察虎纹镇痛肽(HWAP-Ⅰ)硬脊膜外腔给药对家兔的镇痛作用。家兔经氯胺酮麻醉后,用12号硬脊膜穿刺针,从兔的L4~L5椎间隙进入兔硬脊膜外腔.留置12号麻醉导管于该腔内,经泛影葡胺造影证实后,在皮上做"U"型缝合固定,或将导管与特制注射盘连接,埋置于导管出口附近皮下.HWAP-Ⅰ注射盘注入家兔硬脊膜外腔后,在不同的时间间隔,将5%的福尔马林液注入家兔后足底肉垫皮下,然后根据
采用重物落下冲击砸伤法制作实验用新西兰兔大腿内侧无创面骨折软组织损伤模型,于造模损伤处敷药,结果显示:治疗至第10天,红楼消肿膏及止痛消炎软膏均能减轻造模部位的红肿、减轻疼痛反应、明显缩小肿块,减轻跛行及淤血症状;造模组织病理切片检查显示大多肌纤维结构未见异常(空白不敷药的对照组则肌纤维灶性坏死、肌纤维结构异常),表明红楼消肿膏具有消炎、镇痛、消肿及促进肌纤维结构损伤恢复正常等作用;皮肤过敏试验结
目的:探讨大鼠心肌缺血动物模型的构建.方法:缝扎大鼠冠脉左前降支,于左室前外侧壁形成缺血区域,约占左室壁面积的20%~50%。结果:共完成85例动物模型制作,存活74只,其中60只据术中所见、心电图、及病理检查证实有明确的心肌缺血,心功能下降.结论:该方法制作简单可行,动物存活率满意;但模型欠稳定,需标本量较大以充分筛选.
目的:探讨光明液对实验性光损害大鼠模型的治疗作用。方法: 32只SD大鼠随机分为四组:光明液组、模型组、正常组和VitE组.采用手术显微镜光源(LUX为30,000±50)照射SD大鼠右眼,照射时间为30 min,建立急性光损伤模型。光明液组采用光明液、VitE组采用VitE滴丸进行灌胃治疗,疗程7天,其余组灌服等量蒸馏水.观察指标为细胞凋亡率、Caspase-3活力、NO含量变化及视网膜外核层厚
目的:建立并评价肝部分切除致大鼠术后疲劳综合征实验动物模型(Postoperative Fatigue,POF大鼠模型)。方法:根据POF的发病特征与临床表现,模仿手术的全过程,切除大鼠的部分肝脏,观察手术前后大鼠的行为学改变、营养学指标变化及小肠粘膜应激损伤等,建立并评价POF大鼠模型。结果:不同比例肝部分切除术后大鼠出现不同程度的术后疲劳综合征表现:眯眼、动物体力下降、活动不能、出现抑郁倾向;