【摘 要】
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目的：探索一种体外分离纯化犬骨骼肌成肌细胞的简易方法。 方法：取成年比格犬股中间肌一块,采用机械分解法、一步酶消化法消化分离获取成肌细胞,利用差速贴壁法进行纯化。观
【机 构】
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同济大学附属东方医院 运动创伤关节外科,上海 200120
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目的：探索一种体外分离纯化犬骨骼肌成肌细胞的简易方法。
方法：取成年比格犬股中间肌一块,采用机械分解法、一步酶消化法消化分离获取成肌细胞,利用差速贴壁法进行纯化。观察分离纯化后的成肌细胞的生长状况,绘制细胞生长曲线;并对分离纯化后的成肌细胞进行形态学研究及结蛋白免疫细胞化学的鉴定。
结果：采用该法分离的成年犬成肌细胞成功率高,培养过程生长旺盛,呈现出干细胞的特征,存活率高。免疫细胞化学鉴定显示90％以上的细胞呈肌细胞特异抗体(结蛋白染色)阳性反应,说明该法获得的成肌细胞纯度较高。
结论：该法提供了一种体外成功分离纯化成年犬骨骼肌成肌细胞的简易方法,成功率高,简便易行,值得推广;同时该研究也为利用犬进行成肌细胞治疗的研究奠定了实验基础。
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