【摘 要】
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目的 考察毛蚶抗癌活性蛋白(Arca subcrenata Lischke anticancer protein,ASAP)体外对人慢性粒细胞性白血病K562 细胞的抑制作用,初步探讨其作用机制.方法 倒置相差显微
【机 构】
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北京中医药大学中药学院,北京100102
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目的 考察毛蚶抗癌活性蛋白(Arca subcrenata Lischke anticancer protein,ASAP)体外对人慢性粒细胞性白血病K562 细胞的抑制作用,初步探讨其作用机制.方法 倒置相差显微镜下观察ASAP 作用后K562 细胞形态学变化；Giemsa 染色观察细胞及核的变化；MTT 法考察ASAP 对K562 细胞生长的抑制作用；流式细胞术检测细胞凋亡及周期变化情况；Western blotting 考察凋亡相关蛋白caspase-3 的表达情况.结果 MTT显示,在0-48h,ASAP 对K562 细胞具有明显的抑制作用,呈时间和剂量依赖性,24h和48h 的浓度-效应相关系数分别为0.968(P=1.88E-5)和0.750(P=0.020)；镜下观察,浓度为200μg·mL-1 的ASAP 作用于K562 细胞48h,ASAP 处理组K562 细胞出现变形、多个核或核碎裂等形态学变化；流式细胞术结合Giemsa 染色显示,ASAP 可引起K562 细胞G2-M 期阻滞、多核细胞增多及凋亡,随着ASAP 浓度的增加,细胞凋亡率明显增加,200μg？mL-1 ASAP 处理48h 组K562 细胞凋亡率为早期(32.75±0.07)％以及晚期(31.25±2.19)％vs 对照组的早期(3.7±1.13)％以及晚期(9.9±0.85)％；Western blotting结果显示,ASAP 作用32h 后,凋亡蛋白caspase-3 表达水平出现明显的上调.结论 ASAP主要通过诱导K562 细胞G2-M 期阻滞及caspase-3 通路依赖的细胞凋亡抑制其生长.
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