新城疫基因型差异性单克隆抗体的制备及鉴定

来源 :2016第六届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会第五届全国会员代表大会暨2016学术年会、中国微生物学会兽医微 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ceylong2000
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  目前,NDV弱毒株的混杂对禽病实验室病原诊断工作造成很大困扰。因此,NDV强弱毒株以及基因型的快速鉴别技术是目前亟待解决的重要问题。本研究利用一株与疫苗株LaSota存在显著的抗原性差异的强毒株PI/CHINA/SD/2012/167[1]制备成油乳剂疫苗对小鼠进行免疫制备单克隆抗体。通过间接ELISA检测抗体对该强毒株及疫苗株LaSom的反应性,筛选广谱型和强弱毒株差异型的单抗。有趣的是,研究获得2株存在基因型差异的单抗株。其中,3F10株不与ClassⅠ以及ClassⅡ基因Ⅰ型毒株反应,而与其它毒株都有很好的反应性。而7E1 1株不仅与ClassⅠ以及ClassⅡ基因Ⅰ型毒株反应性弱,而且与疫苗株LaSota和Mukeswar的反应性也远远低于ClassⅡ基因Ⅵ,Ⅶ和ⅨX型的强毒株。通过细胞转染进行Western Blot和间接免疫荧光检测,3F10株针对NDV M蛋白,而7E11株针对NDV F蛋白。两株单克隆抗体与NDV不同基因型毒株毒株反应的差异性,为今后NDV的鉴别诊断技术的研究奠定了基础。
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