拟南芥T1N6_ 22基因编码的蛋白为NAD (P)结合Rossmann-折叠蛋白家族的成员,具有葡萄糖脱氢酶活性,短链氧化还原酶活性,参与植物体内各种催化反应和新陈代谢过程。实验室前期获得了拟南芥抗病相关基因T1N6_22,明确了该基因正调控拟南芥抗灰葡萄孢过程,负调控拟南芥抗丁香假单胞杆菌过程。本研究以拟南芥野生型Col-0的cDNA为模板,使用包含酶切位点BamH I和Sal I的特异引物扩增获得T1N6_ 22基因不含终止密码子的CDS序列,通过酶切和连接使其与pCAMBIA1300-GFP载体相连,经PCR、酶切和测序鉴定,确定了pCAMBIA1300-GFP：：T1N6_22载体构建成功。利用PEG4000介导的原生质体转化技术,将构建好的pCAMBIA1300-GFP∶：T1N6_22载体和空载体pCAMBIA1300-GFP分别转入拟南芥的原生质体。利用激光共聚焦显微镜,在488 nm的激发光下观察转化的拟南芥原生质体。结果发现,转入pCAMBIA1300-GFP∶：T1 N6_22载体的拟南芥原生质体在细胞质及叶绿体部位能检测到GFP荧光,而转入空载体pCAMBIA1300-GFP的原生质体只在叶绿体部位检测到GFP荧光,表明拟南芥T1N6_22基因定位于细胞质。研究结果为T1 N6_ 22互作蛋白的筛选与鉴定及进一步明确该基因调控拟南芥抗病的机制奠定基础。