特定环境中不同饲料香原料降解菌株的筛选及其降解机理的研究

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为解决香味剂生产厂有组织排放所造成的空气污染问题,本实验采集了饲料香味剂生产车间周围的土壤与水体样品,在实验室条件下分离纯化了样品中的微生物。共分离出优势细菌33株,其中好氧菌9株,厌氧菌24株;对33株细菌进行革兰氏染色,有革兰氏阳性菌(G+)20株,革兰氏阴性菌(G-)13株;对菌株用Sanger双脱氧链终止法测序,成功测序31株,归类到17种细菌中。有苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)7株,深海微小杆菌(Exiguobacterium profundum)3株,表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)2株,蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)6株,空气芽孢杆菌(Bacillus aerius)1株,同温层芽孢杆菌(Bacillus stratosphericus)1株,韩国假单胞菌(Pseudomonas koreensis)1株,食树脂假单胞菌(Pseudomonas resinovorans)1株,假蕈状芽孢杆菌(Bacillus pseudomycoides)1株,巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)1株,假单孢杆菌(Pseudomonas chloritidismutans)1株、琼氏不动杆菌(Acinetobacter junii)1株,恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)1株,解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)1株,甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)1株,枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)1株、Azoarcus communis1株。利用分离纯化后的菌株作为生物材料对两种特定饲料香原料(丙位癸内酯和辛酸)进行降解。培养基内添加香原料后接种菌悬液作为实验组,仅接种菌悬液作为对照组,空白培养基作为空白对照,GC-MS测定实验组降解产物,计算降解率。结果表明有降解作用的菌共6株3种,分别为苏云金芽孢杆菌(W1、W8、Y1、YO2)、深海微小杆菌(白粗)和蜡样芽孢杆菌(S7);降解丙癸的4株:W8、S7、W1、白粗,降解辛酸的5株:Y1、YO2、白粗、S7、W8;丙癸最大添加量为10μL/25mL,辛酸最大添加量为12μL/25mL;三次降解实验后,不同菌株对丙位癸内酯平均降解率:白粗(71.00%)>S7(52.84%)>W1(50.68%)>W8(46.21%),不同菌株对辛酸的平均降解率:Y1(77.70%)>W8(75.33%)>S7(67.24%)>YO2(54.10%)>白粗(44.84%)。GC-MS测定结果表明所有菌株在降解这两种香原料时并没有产生与对照组不同的挥发性物质;宏基因组测序结果表明,菌种的一级新陈代谢途径中包含了脂类和碳水化合物的等11种次级新陈代谢,本文的两种香原料可以为细菌生长提供相应的元素,说明这些细菌降解的机理是将香原料用于自身的生长。
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