干酪乳杆菌菌剂制备及其功效分析

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肠道微生态制剂是基于肠道微生态学原理而制成的一类可以调节肠道微生态平衡,提高人类、畜禽及植物等宿主健康水平的人工培养菌群及其代谢产物或增进健康状态的正常菌群及其代谢产物和选择性促进宿主正常菌群生长繁殖。Lactobacillus casei耐酸及耐受胆汁的能力较强,能有效调节血浆中胆固醇的含量,使得宿主对致病菌的非特异性拮抗显著增强,同时加速对其清除,,从而治疗肠道菌群紊乱,防止过敏症状和急性胃肠道炎症。L.casei还可使宿主免疫的细胞尤其是中性粒细胞的嗜菌能力显著增加,对其进行免疫调节,防治肿瘤的产生。本论文采用的干酪乳杆菌可以产生对于部分革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌都具有明显抑制效果的广谱型抗菌物质细菌素,尤其是对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌、单核增生李斯特菌具有明显的抑菌作用,且在pH值在3.05.5的范围内稳定性较好,且具有良好的热稳定性。同时还具有良好的耐受胃液、肠液、胆汁及耐盐的性能。实验结果表明L.casei TCCC502和L.casei TCCC503在pH 1.5人工胃液中仍然可以生存3h之久,在pH 2.54.5时,两株测试菌有增长趋势,且具有一定的活力。L.casei TCCC502在人工肠液中作用一段时间后,活菌数在10.1610.96(对数值)之间,而L.casei TCCC503在10.2110.5(对数值)之间。同时菌株对胰蛋白酶消化的耐受力较好,活菌数都在1010个/mL以上;可在2.5g/L的牛胆盐中生长;干酪乳杆菌菌体浓度随着NaCl浓度增加而降低,但当浓度为7.5%时仍能保持很好的生长状态。综上得出结论,干酪乳杆菌无论是从生理功能还是耐受能力上来说都具有较高的食品药品应用价值。以10%的脱脂乳粉作为冻干保护剂,以CaCl2、壳聚糖(0.5%)和乙酸(1%)为固化液,加之2%低聚果糖为辅料,以2%海藻酸钠和3%氯化钙为包埋材料,以明胶和多孔淀粉为囊壁采用喷雾干燥法对干酪乳杆菌冻干菌粉包埋制得微胶囊。微胶囊在人工胃液中停留2.5小时,测得溶液A值趋于恒定,检测到L.casei的缓释率最高达到0.1,将其转移至人工肠液,检测到L.casei释放速率和释放数量均显著变大。结果显示,S1、S2、S3和S4四种供试微胶囊制剂在模拟胃液中处理2.5h,溶液的OD600趋于恒定,干酪乳酸菌的释放值达到最大,约为0.1,将S1、S2、S3和S4四种微胶囊制剂转移至模拟肠液中后,干酪乳杆菌的释放速度和释放量明显增大。实验发现,当环境湿度为33%时,S1、S2、S3和S4四种干酪乳酸菌微胶囊制剂中干酪乳杆菌生存个数分别为5.5×105,4.8×106,3.6×107和6.5×107cfu/g。当环境相对湿度达到97%后,实验显示微胶囊样品中干酪乳杆菌的的活菌大大减少。如检测样S3,此时的活菌数仅仅为1.5×104cfu/g。据信微生物的生长代谢活动和微胶囊中辅料成分都会因为湿度的提高发生变化,最终不利于产品质量的稳定。干酪乳杆菌微胶囊由于受到海藻酸钠等囊材的保护在胃液中释放速度和释放量极低,但到达肠液中释放速度和释放量均明显增加。这说明微胶囊中的干酪乳杆菌可以在人体肠道中达到极大的释放,利于其在肠道中的定植及发挥作用。另外通过多次动物实验,证明干酪乳杆菌对一些低温细菌和腐败菌有很好的抑制作用,能够有效调节肠道内的菌群平衡。本论文选用干酪乳杆菌制备肠道微生态调节剂,对其生长性能抑菌活性胃肠道环境耐受性等进行了系统分析,系统研究小试规模发酵过程中温度和pH值对收率的影响,进一步探讨微囊制剂的配方,初步获得干酪乳杆菌微囊制剂并对其进行性能分析。
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