【摘 要】
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牛传染性鼻气管炎病毒BarthaNu/67株在牛肾细胞中增殖后,提取DNA作为模板.经PCR分六段扩增编码糖蛋白E的基因,并克隆至pET32a表达载体中.在大肠杆菌中进行表达,其中两个片段
【机 构】
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哈尔滨医科大学实验动物学部,黑龙江,哈尔滨,150086
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会
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牛传染性鼻气管炎病毒BarthaNu/67株在牛肾细胞中增殖后,提取DNA作为模板.经PCR分六段扩增编码糖蛋白E的基因,并克隆至pET32a表达载体中.在大肠杆菌中进行表达,其中两个片段以可溶形式表达,一个片段以包涵体形式表达,另外三个片段没有表达.利用pET32a表达载体氨基端6个组氨酸标签,采用固定化金属离子亲和层析法在非变性条件下对两个可溶片段进行纯化.经免疫印迹试验和间接ELISA检测证明,这两个纯化的重组蛋白均与牛传染性鼻气管炎阳性血清样品发生反应,而与牛传染性鼻气管炎阴性血清无任何反应,显示其具有良好的抗原性和特异性。
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