【摘 要】
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目的长波紫外线(UVA)是导致皮肤衰老的主要环境因素,p66Shc与氧化应激和细胞的衰老密切相关。本研究旨在观察黄芩苷是否可以保护人成纤维细胞防止UVA辐射对其所致的氧化损伤
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院皮肤性病科;
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目的长波紫外线(UVA)是导致皮肤衰老的主要环境因素,p66Shc与氧化应激和细胞的衰老密切相关。本研究旨在观察黄芩苷是否可以保护人成纤维细胞防止UVA辐射对其所致的氧化损伤和光老化。方法分离新生儿包皮培养人原代成纤维细胞,以不同剂量的UVA(5、10J/cm2)照射细胞,药物干预组于照光前加入50μg/mL黄芩苷孵育,对照组进行模拟照射。照光后分别继续培养24h和2周进行检测。我们采用组织化学染色法检测细胞中衰老相关β半乳糖苷酶(β-Gal)的表达量,观察细胞照光后的老化情况,以比色法检测细胞上清液中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)含量变化,采用流式细胞仪测定细胞周期变化,以实时定量PCR法检测p66Shc和基质金属蛋白酶(MMP-1)mRNA表达水平变化。结果正常细胞组及黄芩苷组均只见少量的β-半乳糖苷酶阳性细胞,而UVA组该阳性细胞数显著增加,加入黄芩苷预处理可使老化的阳性细胞数回复至接近正常水平。接受UVA照射后,成纤维细胞中SOD和GSH-Px水平明显下降、而MDA则明显上升;经黄芩苷预处理的细胞上清液中SOD和GSH-Px活性显著增加,而MDA水平明显下降(P<0.05)。此外,在UVA照射作用下,成纤维细胞出现了显著G1期细胞阻滞,而黄芩苷可明显减轻这种细胞阻滞作用。同时UVA能够诱导p66Shc和MMP-1基因表达水平升高,而黄芩苷可抑制上述基因的表达。结论黄芩苷可有效保护人成纤维细胞免于UVA损伤和延缓光老化进程,其具体机制可能与抑制氧化损伤和抑制老化相关基因表达有关。
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