【摘 要】
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目的：利用细胞角蛋白19 (K19)启动子构胃粘膜上皮细胞中JCV T抗原表达转基因鼠,试图建立胃粘膜自发肿瘤动物模型.方法：利用限制性内切酶NdeI酶切K19-JCV T抗原表达质粒,电
【机 构】
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110001 沈阳,中国医科大学基础医学院生化与分子生物学研究室
【出 处】
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全国肿瘤病因学和肿瘤流行病学学术会议
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目的：利用细胞角蛋白19 (K19)启动子构胃粘膜上皮细胞中JCV T抗原表达转基因鼠,试图建立胃粘膜自发肿瘤动物模型.方法：利用限制性内切酶NdeI酶切K19-JCV T抗原表达质粒,电泳分离带有K19启动子的T抗原核酸序列后显微注射入C57BL/6J小鼠受精卵中.PCR检测转基因阳性鼠,组织学观察主要脏器的形态学表现及免疫组化检测T抗原表达.结果：显微注射K19-JCVT抗原(KT) DNA片段后成功获得11种转基因阳性鼠,其中2月龄KT7的各脏器组织学检测显示脑、肝、肾、食道、前胃、胃、小肠、大肠、胰腺、肺、心脏和脾组织未见异常形态学改变,JCV T抗原特异表达于胃粘膜上皮细胞和支气管上皮细胞核中,16月龄的KT7转基因鼠13.3％(2/15)出现肺肿瘤和腺癌的病理学改变,T抗原定位于癌细胞细胞核中.结论：JCV T抗原直接诱发肺肿瘤肿瘤动物模型建立为JCV T抗原嵌入所致上皮肿瘤提供了直接的实验依据,为JCV所致上皮肿瘤发生和演进分子机理奠定坚实基础,同时为抗肿瘤药物筛选及基因治疗监控提供了良好的动物模型.
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