【摘 要】
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在植物功能基因组学研究工作中,通过质粒挽救法、反向PCR和TAIL-PCR等技术来获得外源T-DNA插入位点侧翼序列已经成为了一种研究许多功能未知基因的重要手段。本研究以激
【机 构】
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江苏大学生命科学研究院,江苏镇江 212013
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在植物功能基因组学研究工作中,通过质粒挽救法、反向PCR和TAIL-PCR等技术来获得外源T-DNA插入位点侧翼序列已经成为了一种研究许多功能未知基因的重要手段。本研究以激活标签法获得油菜突变体作为实验对象,通过DNAWalking SpeedUp Kit、加接头TAIL-PCR以及不加接头TAIL-PCR来尝试扩增油菜突变体T-DNA插入位点侧翼序列,经反复验证这些方法对油菜多倍体侧翼序列扩增效率较低,我们将实验改进,利用TAIL-PCR的改良版FPNI-PCR,并对PCR程序中循环数、酶量、引物等方面进行改良,成功获得油菜长角果突变体的旁侧序列,为进一步研究基因的功能奠定了基础。
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