【摘 要】
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目的 观察超声辐照破坏微泡改变犬局部心肌微环境促进骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)归巢到犬心肌缺血部位的作用.方法 首先探讨不同强度的超声辐照破坏微泡对犬心肌组织的生物学效应并筛选出最佳的超声辐照条件.然后,观察超声辐照破坏微泡改变犬局部心肌微环境促进犬MSCs归巢到心肌缺血部位的作用.9只健康成年杂种犬随机分成3组,每组3只.采用频率为1 MHz,强度不
【机 构】
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重庆市第三人民医院,重庆,400014 重庆医科大学附属第二医院超声科
【出 处】
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1st International Symposium on Ultrasound Molecular Imaging
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目的 观察超声辐照破坏微泡改变犬局部心肌微环境促进骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)归巢到犬心肌缺血部位的作用.方法 首先探讨不同强度的超声辐照破坏微泡对犬心肌组织的生物学效应并筛选出最佳的超声辐照条件.然后,观察超声辐照破坏微泡改变犬局部心肌微环境促进犬MSCs归巢到心肌缺血部位的作用.9只健康成年杂种犬随机分成3组,每组3只.采用频率为1 MHz,强度不同的超声辐照犬心肌组织,辐照时间为10 min,同时静脉输入2ml(浓度为2×108/ml)微泡造影剂.辐照完毕后即刻处死动物,取局部心肌组织,进行HE染色和透射电镜检测,筛选出最佳的超声辐照条件.24只心肌梗死模型犬随机分成两组(实验组与对照组).在心肌梗死模型建立1W后,实验组用超声经胸辐照左室前壁,辐照10 min,同时静脉输注2 ml(浓度2×108/ml)微泡造影剂,每3d辐照一次,1周共处理3次；对照组不经任何处理.在心肌梗死模型建立2W后每组处死一半动物,在心肌梗死边缘区取局部心肌组织,通过Western blot、定量实时PCR及免疫组织化学检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor VEGF),基质细胞衍生因子1(Stromal cell-derived factor-1,SDF-1),血管内皮细胞黏附因子1(vascular cell adhere molecular-1,VCAM-1),白介素1β(Interleukin 1,IL-1β)的表达水平,观察超声辐照破坏微泡对心肌微环境的影响.余下的实验组动物经冠状动脉输注5ml(浓度1.35×106/ml),DAPI标记的MSCs.对照组输注等量的干细胞.移植5d后处死动物,取心肌梗死边缘区组织,用激光共聚焦显微镜观察MSCs在心肌缺血区的分布情况.结果 发现频率为1MHz,强度为1.0 W/cm2的超声辐照破坏微泡能使心肌损伤程度在不重的情况下引起一定程度的炎症反应.Western blot和免疫组织化学检查显示实验组心肌分泌VEGF、SDF-1、VCAM-1、IL-1β较对照组多,定量实时PCR检查到实验组内VEGF、SDF-1、VCAM-1、IL-1β表达明显比对照组多(P＜0.05).通过激光共聚焦显微镜检测到实验组MSCs(66.8±5.03/HPF),明显比对照组MSCs(14.6±3.76/HPF)分布多(P＜0.05).结论 超声辐照破坏微泡可以引起心肌内源性生物活性物质的分泌,能促进VEGF、SDF-1、VCAM-1和IL-1β分泌,改变了局部心肌微环境,可明显促进MSCs归巢到心肌缺血部位.
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