【摘 要】
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为了研究番木瓜环斑病病毒海南分离物(PRSV HN-2)的全部核苷酸序列，应用植物总RNA提取试剂盒获得了高纯度的总RNA，使用Oligo dT-Adaptor和Random9引物合成了cDNA的第一链，基于已报道的PRSV全长基因组序列，设计合成了一对引物，一步法RT-PCR扩增出PRSV海南分离物全长基因组cDNA。为了验证获得的全长基因组cDNA的正确性，以扩增出的全长cDNA为模板，将PR
【机 构】
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中国热带农业科学院热带生物技术研究所，分析测试中心 海口 571101 海南大学农学院 海口 570228
【出 处】
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2011年度中国热带作物学会遗传育种专业委员会年会暨学术研讨会
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为了研究番木瓜环斑病病毒海南分离物(PRSV HN-2)的全部核苷酸序列，应用植物总RNA提取试剂盒获得了高纯度的总RNA，使用Oligo dT-Adaptor和Random9引物合成了cDNA的第一链，基于已报道的PRSV全长基因组序列，设计合成了一对引物，一步法RT-PCR扩增出PRSV海南分离物全长基因组cDNA。为了验证获得的全长基因组cDNA的正确性，以扩增出的全长cDNA为模板，将PRSV全长基因组分成A和B两个大片段进行扩增，并应用T载体进行了克隆和测序，测序结果显示，其与国内外报道的PRSV各分离物全长核苷酸序列的相似性很高，表明本文建立的一步法RT-PCR扩增尸脑PRSV全长基因组cDNA的方法正确、可行。
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