粉纹夜蛾颗粒体病毒增效蛋白基因的PCR扩增及其克隆

来源 :第七届全国杀虫微生物学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:asdofu0q84313480
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以粉纹夜蛾颗粒体病毒(Trichoplusia ni Granulosis Virus简称TniGV)基因组DNA作模板,设计引物为:(1)5TCCTCCAATGTTGCACGATT和(2)5AACTcACTG TTGAACGITAT,通过PCR方法扩增增效蛋白(enhancin)基因,经0.7℅琼脂糖凝胶电泳,得到一条长约2.9kb的片段,经dot blot验证,扩增片段为阳性结果以pGEM-T作载体与电泳纯化后的PCR产物,用T4 DNA连接酶连接并转化人E.coliTG1受体菌,经Amp平板筛选并以LacZ基因插入失活为标记挑出转化子,提取质粒DNA,经SalI,Bam HI,KpnI3种单酶切,电泳检测,得预期的结果,获得了含增效蛋白基因全长片段的克隆。
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