【摘 要】
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采用优化的病毒蚀斑分析法(PFU)和组织细胞培养半数感染剂量(TCID50)法,在三种细胞系MA-104、Caco-2和Vero中,对猴轮状病毒标准株SA-11进行滴度测定.
结果表明,胰蛋白酶处理
【机 构】
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北京中医药大学北京100029北京中医药大学北京100029清华大学环境科学与工程系环境模拟与污染控制国家重点联合实验室北京100084
【出 处】
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第七届全国中医药生物化学与分子生物学学术交流会
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采用优化的病毒蚀斑分析法(PFU)和组织细胞培养半数感染剂量(TCID50)法,在三种细胞系MA-104、Caco-2和Vero中,对猴轮状病毒标准株SA-11进行滴度测定.
结果表明,胰蛋白酶处理过的SA-11在MA-104和Caco-2细胞中形成较好的病毒空斑,两种细胞形成的空斑数较一致;而SA-11在Vero细胞中很难观察到病毒空斑和细胞病变.确定可利用这两株细胞进行蚀斑分析和病毒的分离鉴定,Vero细胞不适合作为蚀斑分析的细胞。TCID50实验结果表明,蚀斑分析法与 TCID50法的敏感性相同,按照波松分布规律,即1个PFU=1.44个TCID50.同时,利用PCR技术对产生了蚀斑的细胞进行cDNA的扩增。结果表明,所扩增的片段是猴轮状病毒标准株SA-11的VP7基因序列,直接证明蚀斑分析法和TCID50法的特异性。
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