【摘 要】
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为了明确大菱鲆(Scophthalmus maximus)Caspase 9基因序列特征及其在鳗弧菌胁迫过程中的作用,应用末端快速扩增(Rapid amplification of c DNA ends,RACE)技术克隆获得大菱鲆
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为了明确大菱鲆(Scophthalmus maximus)Caspase 9基因序列特征及其在鳗弧菌胁迫过程中的作用,应用末端快速扩增(Rapid amplification of c DNA ends,RACE)技术克隆获得大菱鲆Caspase 9全长,该基因全长为1806 bp,开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)为1308 bp,编码一个由435个氨基酸残基组成的多肽。BLASTP相似性比对结果发现,大菱鲆Caspase 9与其他脊椎动物的Caspase 9具有较高的同源性,其中与杜氏狮鱼同源性最高为88%;与牙鲆、海鲈和大黄鱼的同源性分别为84%,83%和82%;与锡金小家鼠和野猪的同源性分别为47%,系统进化分析显示,该基因氨基酸序列与其他鱼类Caspase 9聚为一支,并与杜氏狮鱼亲缘关系较近;荧光定量PCR结果显示,Caspase 9基因在大菱鲆各组织中均有表达,其中在肌肉中表达量最低。另外,在鳗弧菌毒性试验中,随着胁迫时间的延长,Caspase 9整体呈现类似波浪形表达谱,表明该基因参与了大菱鲆的免疫防御反应。
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