【摘 要】
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目的:Gβ亚基可以作为相对独立的结构和功能单位与其效应器蛋白结合而引发一系列生化反应，但在Gβγ亚基二聚体中，Gγ亚基的存在可以影响Gβ亚基的结构及其与下游蛋白因子的结合，为了探寻能与Gβγ亚基二聚体相结合的新的蛋白因子，我们选择了以Gβ和Gγ为饵质粒，具有高灵敏度的研究蛋白间相互作用的酵母三杂交系统进行研究.方法:利用酵母三杂交体系，分别构建含Gβ1、Gγ2基因片段的饵质粒，共转染酵母细胞Y19
【机 构】
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中国医学科学院,中国协和医科大学,基础医学研究所,国家医学分子生物学重点实验室,北京,100005
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目的:Gβ亚基可以作为相对独立的结构和功能单位与其效应器蛋白结合而引发一系列生化反应，但在Gβγ亚基二聚体中，Gγ亚基的存在可以影响Gβ亚基的结构及其与下游蛋白因子的结合，为了探寻能与Gβγ亚基二聚体相结合的新的蛋白因子，我们选择了以Gβ和Gγ为饵质粒，具有高灵敏度的研究蛋白间相互作用的酵母三杂交系统进行研究.方法:利用酵母三杂交体系，分别构建含Gβ1、Gγ2基因片段的饵质粒，共转染酵母细胞Y190感受态，筛选人脑cDNA文库；并进一步在哺乳动物细胞中用免疫共沉淀法对酵母三杂交筛选的阳性克隆进行的鉴定.结果:获得了能与Gβγ亚基二聚体相结合的新的蛋白因子，并在哺乳动物细胞中验证了这种相互作用；另外还获得了3条编码能与Gβγ亚基二聚体相结合的未知蛋白因子的cDNA序列(已被GeneBank收录，收录号分别为:AF456477，AF456478，AF456479).结论:在人脑中，Gβγ亚基二聚体能够通过一些新的蛋白因子参与细胞信号传导.
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