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目的近年来微波技术广泛应用于军事、通讯、医疗及人类日常生活等领域,对工作和生活带来便利的同时也对人们的健康造成了潜在危害。迄今关于微波辐射损伤研究主要集中于男性睾丸,对女性的研究相对较少,且多仅主要研究靶器官卵巢,少有对子宫和输卵管的同步关注研究,同时,有关对生育和子代影响的文献大多均仅观察一代,迄今更未见微波对不同性周期卵巢、输卵管与子宫同步研究及其多代生育和子代影响的报道。基于上述,本文以不同性周期成年雌性Wistar大鼠为对象,进行连续三代生育实验研究,以阐明其对多代生育和子代的影响,同时,进而通过系统病理形态学及其定量技术同步观测微波辐射致卵巢、子宫及输卵管的损伤规律和五种相关血清雌性激素的动态检测,以揭示微波辐射对各发情周期雌性生殖系统损伤的差异性及其对生育和子代影响的关联性与机理,旨在为防治微波辐射损伤,提高后代健康和生存质量提供生物学基础。研究方法(略)实验结果一、微波对不同性周期雌鼠生殖系统影响的实验结果1.卵巢各级卵泡的变化:微波照射组各时间点和各发情周期的各级卵泡细胞变性、凋亡和坏死,原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡及成熟卵泡闭锁数量较对照组均增加,其中以发情间期最为明显,发情前期和发情期依次减少。2.卵巢黄体变化:照射组各时间点膜黄体细胞变性总数量较对照组明显增多,同时,颗粒黄体细胞具有类似规律;其中发情期(RO)膜黄体细胞变性数量较发情间期(RD)和前期(RP)减少趋势。3.输卵管变化:微波组照射后输卵管不同时间和不同周期均以皱襞低疏型发生率显著增加,皱襞高密分支型显著减少为突出特点,其中尤以后者减少为明显。4.子宫变化:微波组雌鼠照射后子宫在不同时间和不同性周期均以静止型、初期增生型和中期增生型发生率呈减少趋势,而分泌增生型显著增加(P<0.05)为突出特点,其中发情期的增加尤为明显,同时,子宫管径增大、管壁(尤其内膜层)增厚。5.血清雌性激素水平变化:微波照射组后雌二醇(E2)水平基本呈递降趋势,尤以发情期较明显;微波照射组孕酮(P4)分泌水平于5 d和30 d显著高于对照组,而于10~20 d呈降低趋势;微波照射组卵泡刺激素(FSH)分泌水平除发情期照射后5 d略升高外,于20~30 d则呈降低趋势;微波组发情期黄体生成素(LH)分泌水平于照射后5 d先高,10~20 d降低,30 d恢复趋势;辐射后不同时间抗苗勒激素(AMH)水平下降具有共性规律:即均以5 d时最高、10 d下降最为明显,然后于20~30 d逐渐恢复趋势。二、微波对不同性周期雌鼠三代生育影响的实验结果1.三代生育率比较:微波组第一代生育率(59.3%)较对照组显著降低(100%,P<0.05);第二代雌鼠生育率(82.4%)较第一代呈恢复趋势,但仍低于对照组(100%);第三代生育实验微波组与对照组生育率均降低(分别为86.4%和95.5%),但前者仍低于后者,并略高于第二代,提示第三代呈进一步恢复趋势;微波组连续三代的总生育率较对照组明显降低(分别为80.0%和97.7%,P<0.01),其中发情间期组最低(68.6%),发情期组最高(96.9%),发情前期组介于其间(89.3%)。2.三代母鼠分娩时间比较:第一代对照组母鼠全部在24~27天分娩;微波组仅50%在24~27天分娩,其余则明显延迟(至28~32天);第二代和第三代微波组母鼠分别67.6%和74.6%在27天内分娩,分娩时间较第一代呈恢复趋势;但其余则明显延迟(分别延迟至34天和38天);其中发情间期组的延迟时间长于发情期组和发情前期组。3.三代仔鼠各性周期存活率与死亡率比较:第一代对照组母鼠1/12只发生死胎(8.3%),微波组母鼠则4/16只死胎(25.0%),其中1只因难产死亡,提示微波组胎死率高于对照组;第二代对照组母鼠1/10只死胎(子宫破裂所致),微波组死胎5/37只(13.5%);第三代生育实验于冬季进行,微波组与对照组均发生胎死亡现象,发生率相近;提示微波组第一代胎死率较对照组增高,第二三代呈渐降低趋势;微波组三代总计发生胎死的11只母鼠分别为发情间期8/42只,发情前期2/20只,发情期1/20只,提示发情间期胎死率较高。4.三代仔鼠的数量和性别比较:微波组第一、二代母鼠生育的仔鼠平均数量与对照组未见明显差异,第三代明显降低,并具有统计学意义(P<0.01);微波组三代母鼠生育的所有仔鼠平均数量较对照组明显降低,具有统计学意义(P<0.05);微波组各代及三代总计的仔鼠性别均呈雄性较雌性略高趋势,均未见统计学意义(P>0.05)。5.不同性周期三代仔鼠体重的比较:微波组三代各性周期所有仔鼠出生当日和1~8周的体重均较对照组呈减轻趋势,具有延缓体重每周增长速度、减低增长幅度等影响,尤其第一代和第三代较明显,其恢复具有缓慢性规律和特点;其中发情间期依次较发情前期、发情期明显,雄性和雌性间同样未见明显差异。6.不同性周期雌鼠三代仔鼠畸形发生率比较:三代对照组均未见畸形,照射组畸形总发生率8.7%(9/104只),其中第一代较高(25.1%,P<0.05),第二代(2.7%)和三代(7.8%)呈减少/恢复趋势;发情间期发生率较高(12.5%),发情前期和发情期较少(分别为4.0%和6.5%)。7.不同性周期三代仔鼠畸形种类比较:三代均以肢体和尾缺如或短小等体表畸形多见(12种),内脏器官畸形较少(2种),第一代种类较多,第二、三代较少,内脏器官畸形与体表畸形间未见关联性;发情间期种类最多,发情前期和发情期依次减少。三、微波辐射后不同性周期雌鼠三代生育障碍机理的研究1.生殖器官的组织结构损伤病变为三代生育障碍的病理形态学基础(机理之一):动态和和定量检测表明,不同性周期生殖器官组织结构损伤的数量和程度均以发情间期最多见和严重,发情前期和发情间期依次减少和减轻(包括卵巢各级卵泡闭锁和卵母细胞、颗粒细胞及黄体细胞变性凋亡和坏死,子宫内膜上皮细胞变性凋亡和坏死及子宫腺损伤,子宫黏膜皱襞静止型和增生分泌型"比例失调"和管径增大、管壁(尤其内膜层)增厚,以及输卵管的类似损伤病变),表明发情间期卵巢、子宫结构对微波辐射具有较发情期更高的敏感性,并与具有三代生育率障碍具有高度一致性和密切关联性。2.雌性激素分泌水平紊乱为三代生育障碍的病理生理学基础(机理之二):微波组原代母鼠五种相关雌性激素(E2、P4、FSH、LH、AMH)分泌水平发生不同程度紊乱,同样于发情期、发情前期和发情间期依次加重,并与卵巢、子宫结构损伤病变具有基本一致性,提示雌性激素水平紊乱与三代生育率降低、仔鼠畸形率增高等生育障碍同样具有密切关联性。3.上述两种基础的"复合作用"及其"叠加效应"为三代生育障碍的主要机理:通过综合分析表明,微波组不同性周期三代雌鼠生育障碍的主要机理为各性期生殖器官组织结构的损伤病变及其差异性与多种雌性激素分泌水平的紊乱及其差异性的"复合作用"与其"叠加效应"(即1+1≥2)所致,是影响三代生育障碍的主要机理,并具有高度关联性。