无症状性脑动脉粥样硬化与大动脉粥样硬化型脑梗死患者血浆miRNAs差异表达谱分析

来源 :2015第十五次中国脑血管病大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ubqazw
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目的 建立无症状性脑动脉粥样硬化(AS)及大动脉粥样硬化型脑卒中(Large artery atherosclerotic,LAA)患者血浆miRNAs差异表达谱.方法 分别选取8名无症状性脑动脉粥样硬化患者(AS组)、LAA型脑卒中患者(LAA组)和健康对照者(control组),用mirVana PARIS试剂盒提取总RNA,采用Ambions miRNA分离试剂盒分离富集miRNAs,然后在RNA的5和3端加上接头后,进行RT-PCR,最终得到的PCR纯化产物用于高通量测序.Solexa高通量测序技术检测每组血浆标本miRNAs表达谱,Fold-change法筛选差异表达的miRNAs:差异表达的miRNA定义为表达量差异在2倍及以上且P≤0.01.对差异表达的miRNAs进行靶基因预测和GO分析(分别描述靶基因的分子功能、所处的细胞位置、参与的生物过程),以校正后P<0.01为显著性阈值.选取归一化表达量较高的miRNAs (miR-146b-5p、miR-23a-3p、 miR-10b-5p)采用实时荧光定量PCR技术对高通量检测结果进行验证.
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