目的:生殖干细胞具有自我复制和分化成配子的能力,是动物体内唯一能进行遗传信息传递的干细胞.因此,生殖干细胞既是干细胞生物学的重要研究对象,又是研究配子发生、制作转基因动物和研究基因功能的重要资源.而且有助于更全面深入地理解性腺功能生理性和病理性衰退的机制,并可能推动生殖干细胞在再生医学中的应用.然而哺乳动物生殖干细胞的存活需要其特定的微环境,在性腺组织中数量也极少,大大限制了对其生物学特性的进一步研究,因而建立生殖干细胞稳定可靠的体外培养体系是非常必要的. 方法:本研究取出生后4~7 d的昆明白小鼠睾丸或卵巢，采用机械法和两步酶消化法制成单细胞悬液，差速贴壁法或免疫磁珠分选法富集纯化雄性或雌性生殖干细胞，添加特定培养液，以小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)作为饲养层细胞进行体外培养。 结果:小鼠生殖干细胞在体外能够存活2周以上并出现分裂增殖并保持未分化状态。 结论:本研究已经初步建立起了一个小鼠生殖干细胞的培养体系，包括生殖细胞的分离、培养、富集分选和MEF饲养层的制备。但生殖干细胞自我复制机制的阐明和其体外长期培养条件的优化还需要进一步研究。