融合表达淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒和卵清白蛋白CD8<'+>T细胞表位的减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建与鉴定

来源 :中国微生物学会兽医微生物专委会学术年会中国畜牧兽医学会生物制品学分会第九次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gudujian13
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依据淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)主要保护性抗原CD8<+>T细胞表位VRRPQASGVYMGNLTAQ和卵清白蛋白(OVA)CD8<+>T细胞表位SIINFEKL,设计、合成两务编码LCMV和OVACD8<+>T细胞表位的寡核苷酸片段,经退火后,克隆入绿色荧光蛋白表达质粒pYAGFP,经PCR扩增和序列测定分析,证实成功构建T细胞表位与绿色荧光蛋白融合表达的重组质粒pYAGFPL-O,将此重组质粒pYAGFPL-O转化减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550,获得重组沙门氏菌X4550(p)YAGFPL-O).用SDS-PAGE电泳则得重组菌表达的融合蛋白约为30KD.同时,荧光显微镜下观察到X4550(p)YAGFPL-O)发出黄绿色荧光.这些结果表明LCMV和OVA T细胞表位已成功表达.重组菌X4550(p)YAGFPL-O)的获得为研究沙门氏菌载体携带外源抗原的T细胞应答规律及调控机于打下了重要基础.
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