【摘 要】
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目的：通过改变转录因子CREB(cAMP-responsive element binding protein)的表达,探讨CREB定向调控根尖牙乳头干细胞分化的分子机制.方法：分离培养人根尖牙乳头干细胞(SCAPs,
【机 构】
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安徽医科大学附属口腔医院牙体牙髓病科
【出 处】
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中华口腔医学会牙体牙髓病学专业委员会第五次全国牙体牙髓病学临床学术研讨会
论文部分内容阅读
目的：通过改变转录因子CREB(cAMP-responsive element binding protein)的表达,探讨CREB定向调控根尖牙乳头干细胞分化的分子机制.方法：分离培养人根尖牙乳头干细胞(SCAPs,Stem ceils from the apical papilla)；分别构建慢病毒载体介导的CREB过表达和沉默的根尖牙乳头干细胞；将空白对照组、病毒对照组、CREB过表达/沉默组矿化诱导后,茜素红染色及定量分析2周后的矿化能力；实时定量PCR检测1、2、3周时碱性磷酸酶(alkaline phosphateasea,ALP)、Ⅰ型胶原(collagen type Ⅰ,Col-Ⅰ)、骨钙素(osteocalcin, OCN)的mRNA表达；Western Blot检测成牙本质特异性蛋白DSP (dentin sialoprotein)及OCN的表达.结果：茜素红染色及定量显示,CREB过表达组形成钙结节能力增强,CREB沉默组则减弱(P＜0.05)；矿化诱导1、2、3周,CREB过表达组ALP、Col-Ⅰ、OCN的mRNA几乎均上升,且DSP蛋白表达升高(P＜0.05),OCN蛋白表达未见明显差异,而沉默CREB则下调矿化基因的mRNA,DSP蛋白表达显著下降(P＜0.05).结论：在SCAPs矿化诱导过程中,过表达CREB促进SCAPs成牙/骨分化,而沉默CREB则发挥相反作用,提示CREB日可能促进SCAPs的定向分化能力.
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