论文部分内容阅读
目的:外科手术使机体产生急性应答,引发应激性炎症反应,伴随着具有高水平促炎介质加工释放的免疫系统激活,导致免疫功能受抑。而手术应激导致的免疫抑制效应,是造成术后感染及加速残存肿瘤转移的重要原因。利多卡因不仅具有镇痛、抗痛觉过敏、抗心律失常的作用,还具有抗炎作用。而高迁移率族蛋白B1(HMGB1)作为一种晚期炎症蛋白,可介导机体对感染及损伤的炎症反应。本研究通过观察术中持续静脉输注小剂量利多卡因对宫颈癌手术患者淋巴细胞、单核细胞功能及HMGB1释放的影响,探讨利多卡因对手术创伤致机体免疫功能下降的保护作用及机制,为其应用于临床抗炎治疗提供理论依据。方法:选择2013年6月至2014年1月于山东大学齐鲁医院择期行全身麻醉下宫颈癌根治术患者30例,所有患者签署知情同意书。随机分为对照组(C)和利多卡因组(L),每组15例。气管插管静吸复合麻醉。L组麻醉诱导前15min静推利多卡因1.5mg/kg(推注时间持续10min),麻醉诱导后微量泵静脉输注利多卡因1.5 mg·kg-1·h-1至病人离开手术间。C组给予相等容量的生理盐水。术前24h、术后0h、术后48h分别抽取病人静脉血10ml,分离血浆与外周血淋巴细胞、单核细胞。ELISA法测定各时间点血浆HMGB1、IFN-γ及IL-4浓度,通过IFN-γ与IL-4浓度的比值(IFN-γ/IL-4)反映Th1/Th2细胞因子平衡的情况,评估两组机体免疫功能的变化差异,CCK-8法进行PHA诱导的淋巴细胞增殖试验,流式Annexin V-PI法进行淋巴细胞凋亡检测。单核细胞分为直接培养组和LPS刺激组,培养24h,ELISA法测定两组细胞培养液上清中HMGB1蛋白。Trizol法提取细胞总RNA,实时定量RTPCR法测定单核细胞HMGB1 mRNA。结果:1、两组病人年龄、体重等无统计学差异(p>0.05)。2、PHA诱导的淋巴细胞增殖:相比于术前24h,与C组比较,L组术后0h(0.448±0.139 vs.0.352±0.112 OD)及术后48h(0A20±0.094 vs.0.326±0.141 OD)淋巴细胞活性下降减少(p<0.05)。3、淋巴细胞凋亡:两组淋巴细胞凋亡比例在术后都有所增加,与C组相比,L组术后48h淋巴细胞凋亡上升幅度较低(3.560±0.775 vs.4.173±0.779%),差异有统计学意义(p<0.05)。4、IFN-γ、IL-4:与C组比较,L组术后48h IFN-γ的浓度(4.041±0.230 vs.3.782±0.282pg/ml)升高,差异有统计学意义(p<0.05);分别计算两组IFN-γ/IL-4的比值,与C组比较,L组比值升高(0.676±0.288 vs.0.489±0.124,p<0.05)。5、血浆中HMGB1表达浓度:与C组比较,L组术后48h血浆中HMGB1表达浓度下降更明显(53.458±8.983 vs.59.387±5.025μg/L),差异有统计学意义(p<0.05)。6、单核细胞培养上清中HMGB1浓度:术后48h,单核细胞直接培养组上清中,与C组相比,L组HMGB1水平下降(64.049±11.24 vs.71.801±9.191μg/L,p<0.05);单核细胞LPS刺激组上清中,与C组相比,L组HMGB1水平明显下降(80.249±5.938 vs.88.168±9.05μg/L,p<0.01)。7、单核细胞HMGB1 mRNA表达水平:术后48h,直接培养组中L组HMGB1 mRNA表达水平低至C组的53%,差异有统计学意义(p<0.05);LPS刺激组中L组HMGBI mRNA表达水平低至C组的59%,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:围术期静脉输注利多卡因可减轻手术创伤对淋巴细胞增殖的抑制作用,减少淋巴细胞术后凋亡,使机体免疫调节平衡向Th1漂移,保护机体免疫功能,其对机体免疫功能的调节作用可能与其能下调单核细胞表达释放HMGB1有关。